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酶解法.酶解法通过利用几丁质酶、纤维素酶或溶壁酶等酶液的一种或多种,使灵芝抱子细胞壁中的成分降解,释放其有效成分.使用生物酶辅助提取灵芝酸A,终实现灵芝酸A的提取率达到0.54%. 溶菌法.利用微生物和灵芝抱子一同发酵,让微生物在发酵过程中降解灵芝抱子细胞壁.利用益生菌枯草芽抱杆菌、嗜酸乳杆菌与灵芝抱子进行液态发酵,终使得灵芝抱子破壁率达到85%以上.化学法化学法的优点与生物法较为相似;缺点是提取溶剂易导致有效成分变性,且溶剂残留不易去除.溶剂提取法.溶剂提取法利用“相似相溶”原理,使灵芝抱子在水、乙醇等溶剂中长时间浸泡或回流,从而使有效成分扩散到溶剂中.例如,Lee等8采用25%乙醇提取灵芝中的成分,终减压浓缩并定容至500mL保存,通过灵芝的25%乙醇提取物,研究其通过Nrf2/HO-1通路增强细胞的抗氧化作用,该方法对灵芝孢子的提取率较好.
神经保护作用灵芝抱子对神经系统有一定的保护作用.Zhou等30研究发现,给大鼠服用高剂量(8g/kg/d)的灵芝抱子粉可以使大鼠海马区谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧酶(GSH/GR)和丙二醛(MDA)恢复到正常水平,保护大鼠的海马区神经细胞,从而减少阿尔茨海默病的发生.Gokce等[31观察到,给予脊髓损伤大鼠灵芝多糖后,其能够减少组织中半胱氨酸蛋白酶-3、肿瘤坏死因子a、过氧化物酶、丙二醛和一氧化氮的水平,从而保护脊髓损伤神经细胞.保肝作用相关研究表明,灵芝抱子具有护肝、保肝作用.Jin等固研究发现,灵芝抱子粉对镉(Cd)引起的肝损伤小鼠具有保护作用,其作用主要是减少血清中ALT、AST含量和肝脏指数,改善组织的病理状态.胡宗苗等[33观察到灵芝抱子对CCl4肝损伤小鼠的纤维化保护作用,经灵芝抱子治疗后可显著降低小鼠血清中ALT和AST含量,升高肝组织中SOD含量,降低MDA含量,组织病理学显示,灵芝抱子可使肝纤维化程度降低,且肝组织中MMP-9蛋白表达显著降低,提示灵芝抱子可能通过调节MMP-9蛋白来改善肝纤维化.
超声波法主要利用超声的空机械振动和空化效应来破坏灵芝抱子细胞壁.例如,Alzorqi等利用超声波提取P-D-葡聚糖,在优化条件下p-D-葡聚糖的产量为5.228mg/g.微波法.微波法利用微波的穿透能力和热效应,使细胞内部的温度迅速上升,从而使细胞内部的压力超过细胞壁膨胀所能承受的压力而破碎,促使其有效成分释放.例如,先将灵芝抱子进行微波处理,而后在低温深加工,灵芝抱子的破壁率可达99%以上.超临界提取法.超临界提取法利用气体在超临界状态下的性质,即流体的性质,使有效成分被流体萃取,Li等M运用超临界CO2萃取技术提取灵芝抱子,萃取率达到37%.机械法机械法的优点是操作简单、易行;缺点是机械设备投资大、运行成本较高.
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